FRET ਪੇਪਟਾਇਡ ਤਕਨਾਲੋਜੀ

ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਰੈਜ਼ੋਨੈਂਸ ਐਨਰਜੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ (FRET)

ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਰੈਜ਼ੋਨੈਂਸ ਐਨਰਜੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ (FRET) ਇੱਕ ਗੈਰ-ਰੇਡੀਏਟਿਵ ਐਨਰਜੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇੰਟਰਮੋਲੀਕਿਊਲਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਜੋੜਿਆਂ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆ ਦੁਆਰਾ ਦਾਨ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਉਤਸਾਹਿਤ ਰਾਜ ਊਰਜਾ ਨੂੰ ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਉਤਸਾਹਿਤ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਫੋਟੌਨ ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸਲਈ ਗੈਰ-ਰੇਡੀਏਟਿਵ ਹੈ।ਇਸ ਪਰਖ ਦੇ ਤੇਜ਼, ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਅਤੇ ਸਰਲ ਹੋਣ ਦੇ ਫਾਇਦੇ ਹਨ।

FRET ਪਰਖ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਰੰਗ ਇੱਕੋ ਜਿਹਾ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪਰ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ, ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਰੰਗਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਸੰਖੇਪ ਰੂਪ ਵਿੱਚ, ਚਮਕਦਾਰ ਗੂੰਜਣ ਵਾਲੀ ਊਰਜਾ ਦਾ ਤਬਾਦਲਾ ਦਾਨੀ (ਡਾਈ 1) ਤੋਂ ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ (ਡਾਈ 2) ਤੱਕ ਡਾਈਪੋਲਜ਼ ਦੇ ਇੱਕ ਜੋੜੇ ਦਾ ਤਬਾਦਲਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਜਦੋਂ ਦਾਨੀ ਸਮੂਹ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਡੋਨਰ ਫਲੋਰੋਫੋਰ ਗਰੁੱਪ ਦਾ ਨਿਕਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਗ੍ਰਹਿਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹ ਦੇ ਸਮਾਈ ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਨਾਲ ਓਵਰਲੈਪ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।"ਜਦੋਂ ਦੋ ਫਲੋਰੋਫੋਰਸ ਵਿਚਕਾਰ ਦੂਰੀ ਢੁਕਵੀਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ (10 - 100 ਏ), ਤਾਂ ਫਲੋਰੋਫੋਰਸ ਊਰਜਾ ਦਾ ਦਾਨੀ ਤੋਂ ਗ੍ਰਹਿਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਤੱਕ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।"ਊਰਜਾ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਦੀ ਵਿਧੀ ਰੀਸੈਪਟਰ ਦੇ ਰਸਾਇਣਕ ਢਾਂਚੇ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ:

1. ਮੌਲੀਕਿਊਲਰ ਵਾਈਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਬਦਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਯਾਨੀ ਊਰਜਾ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਦੀ ਚਮਕਦਾਰ ਰੌਸ਼ਨੀ ਅਲੋਪ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।(ਰਿਸੈਪਟਰ ਇੱਕ ਰੋਸ਼ਨੀ ਬੁਝਾਉਣ ਵਾਲਾ ਹੈ)

2. ਨਿਕਾਸ ਰੀਸੈਪਟਰ ਤੋਂ ਜ਼ਿਆਦਾ ਤੀਬਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸੈਕੰਡਰੀ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਰੈੱਡਸ਼ਿਫਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।"(ਰੀਸੈਪਟਰ ਚਮਕਦਾਰ ਐਮੀਟਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ)।

ਦਾਨੀ ਸਮੂਹ (EDANS) ਅਤੇ ਗ੍ਰਹਿਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਨ (DABCYL) ਐਚਆਈਵੀ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਦੇ ਕੁਦਰਤੀ ਸਬਸਟਰੇਟ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੁੜੇ ਹੋਏ ਹਨ, ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਸਬਸਟਰੇਟ ਨੂੰ ਡਿਸਕਨੈਕਟ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ DABCYL EDANS ਨੂੰ ਕੁਨਲ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਫਿਰ ਫਲੋਰੀਨ ਲਈ ਖੋਜਣਯੋਗ ਨਹੀਂ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ।HIV-1 ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਡਿਸਕਨੈਕਸ਼ਨ ਹੋਣ 'ਤੇ, EDANS ਨੂੰ DABCYL ਦੁਆਰਾ ਬੰਦ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ EDANS ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਨੂੰ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਇਨਿਹਿਬਟਰਸ ਦੀ ਉਪਲਬਧਤਾ ਨੂੰ EDANS ਦੀ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਤੀਬਰਤਾ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦੁਆਰਾ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ.

FRET peptides ਪੈਪਟਿਡੇਸ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਸਾਧਨ ਹਨ।ਕਿਉਂਕਿ ਇਸਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਨਿਰੰਤਰ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਇੱਕ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਤਰੀਕਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਦਾਨੀ/ਸਵੀਕਾਰਕਰਤਾ ਦੁਆਰਾ ਪੇਪਟਾਇਡ ਬਾਂਡਾਂ ਦੇ ਹਾਈਡੋਲਿਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਪੈਦਾ ਹੋਈ ਚਮਕ ਨੈਨੋਮੋਲਰ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਮਾਪ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਜਦੋਂ FRET ਪੇਪਟਾਇਡ ਬਰਕਰਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਅੰਦਰੂਨੀ ਫਲੈਸ਼ ਦੇ ਅਚਾਨਕ ਗਾਇਬ ਹੋਣ ਨੂੰ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਜਦੋਂ ਦਾਨੀ/ਸਵੀਕਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਦੇ ਉਲਟ ਕੋਈ ਵੀ ਪੇਪਟਾਇਡ ਬੰਧਨ ਟੁੱਟ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ਇੱਕ ਫਲੈਸ਼ ਛੱਡਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਦਾ ਲਗਾਤਾਰ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਫਿਰ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।